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目前油菜杂交种生产主要有三种途径,一是利用细胞质雄性不育系,实行“三系”配套制种;二是利用核不育两用系生产杂交种;三是利用自交不亲和系,实行两系制种。这里介绍利用细胞质雄性不育系和利用自交不亲和系制种。 1.利用细胞质雄性不育系生产杂交种 (1)细胞质雄性不育三系亲本的提纯与繁殖技术 ①不育系和保持系的提纯与原种繁殖技术 不育系和保持系的提纯与原种繁殖,需通过单株选择、成对杂交、组合决选、原种繁殖4年,再进入杂交制种。 在不育系和保持系原种繁殖田中,各选取典型植株30株,经室内考种后,各选留15个单株,分别编号、脱粒、留种。 将上年中选单株,分别播成15个株行,挑选符合不育系和保持系典型性状的单株各10个左右,在花期作成对杂交组合15~20个。父、母本单株收种,按组合分别编号保存。 将杂交组合,按顺序播在大棚隔离网室内进行比较,父母本行比1∶2。每个组合播10行,其中父本播4行,母本播6行。苗期10叶左右按顺序编号挂牌,进行同功酶电泳提纯。经酶谱鉴定保留的组合10~13个。 对保留的组合,按初花、盛花和终花3个时期观察不育系育性表现、对不育性较彻底、花器开裂较畅、生长整齐、长势较好的组合选留;分期淘汰不育性不稳定且长势较弱的组合,选留组合数量6~8个。 经初花期育性鉴定中选的组合,在网室内按组合进行人工辅助授粉。 成熟前调查网室内组合的形态特征、生物学特性及抗病性,选优汰劣,选留4~5个组合。 将中选组合的组合间相邻父本行和网室两边靠网的单株割除淘汰,再按父母本序号加附标签分收、分脱、分藏。油菜籽粒细小,整个过程要严防机械混杂。 收获后,再根据不育系、保持系的种子颜色、有无光泽及种子大小、重量等进行决选,保留组合3~4个。将最后决选出的父、母本种子分别混合,即得到保持系和不育系原种。 将原种在大棚隔离网室内再繁殖一次。繁殖中仍要认真去杂去劣,收获的不育系原种,在干燥低温条件下贮藏。另外,为加速生产应用速度,也可拿出少量原种,在本年度用育苗移栽方法在大田繁殖不育系原种,直接供大田杂交制种。 ②恢复系的提纯与原种繁育技术 恢复系的提纯及良种繁育同上,需通过选择单株、株行圃、株系圃、原种繁殖4年,再进入杂交制种。 (2)细胞质雄性不育三系杂交油菜制种技术 ①隔离区 利用细胞质雄性不育系生产杂交种需要二个隔离区,一个隔离区繁殖雄性不育系和保持系,一个隔离区繁殖恢复系和生产杂交种子。 在没有自然屏障隔离的条件下,不同品种间应相距至少1000m;在地形复杂或有自然屏障隔离的条件下,隔离距离 300~500m。 ②调整播期 制种时,应根据两个亲本的生育期的长短合理调整花期,使父母本花期相遇。油菜的花期较长,每朵花的花龄也长。因此,只要根据亲本的生育期进行播期调整,父母本的花期一般能够相遇良好。 ③行比行向 当父本生长势弱、花粉量少时,父、母本可采取1∶2的行比;如果父母本株高和生育期相近、肥水条件好时,父、母本可采取1∶3-4的行比。行向尽量与开花期的风向垂直,一般以南北向为好。 ④去杂去劣 苗期、初花期、成熟期根据品种特征特性去杂去劣。在开花期要注意拔除个别长势特别强的植株,因这些植株很可能是天然杂种。 ⑤调节花期与辅助授粉 如果碰到花期不遇的情况时,可将早开花亲本的主薹摘去,并对摘薹后的亲本偏施氮肥,这样便可使早开花的亲本延迟开花,达到花期相遇。油菜在盛花期每隔 2~3 天进行一次人工辅助授粉。 ⑥收获贮藏 种子成熟后应及时收获。父、母本,分别脱粒、晾晒,防止机械混杂。 2.利用自交不亲和系生产杂交种利用自交不亲和系生产油菜杂交种,需设自交不亲和系(母本)繁殖区、父本繁殖区及杂交制种区三个隔离区。 (1)自交不亲和系的提纯与繁殖 ①自交不亲和系的提纯 自交不亲和系的提纯要首先考虑它的不亲和性,即从自交不亲和系繁殖田中选取典型单株,每个单株进行两种人工套袋自交:一是剥蕾授粉自交,以获得自交种子;二是人工辅助授粉自交和兄妹交,以测定其不亲和性表现。自交时选取植株上部分枝花序2~3个和主花序进行上述两种处理。凡人工辅助授粉自交亲和指数在1以下,剥蕾自交结实率高的单株即可当选。将当选单株的剥蕾自交种子单株收获、脱粒、保存,第二年种成株系圃。苗期、蕾薹期根据自交不亲和系的典型特征特性淘汰不良株系。花期每个株系选10个单株,同上年一样,一方面自交和兄妹交测亲和性表现,一方面剥蕾自交以获得自交种子。收获时先选亲和指数稳定在1以下的株系,然后再在这些株系中,选性状典型且剥蕾自交结实率高的单株,将其脱粒混合,即成自交不亲和系原原种。 ②自交不亲和系的繁殖 A.蕾期授粉法:在开花前2~5天,进行人工剥蕾授粉自交,可以获得一定数量的自交种子。 B.花期盐水喷雾法:在花期用5%~8%的盐水喷雾,可提高自交结实率。 C.利用保持系繁殖自交不亲和系:近年来,一些地方采用测交方法,从甘蓝型油菜的普通品种中和自交不亲和系中筛选出自交不亲和系的保持系,利用保持系来繁殖自交不亲和系。利用作为自交不亲和系的保持系材料,主要有两类:两个自交不亲和系互为保持系,利用自交亲和系保持自交不亲和系。 (2)父本的提纯与繁殖因恢复系是常规品种,所以可按常规品种提纯繁殖的方法进行。在提纯的过程中要进行测交,一方面测定其恢复率,一方面做产量、抗性鉴定,对表现优良的恢复株系,按需种量多少,在隔离条件下进行繁殖。在隔离区播种父本种子,在开花期选择典型植株自交或姊妹交,作为下年父本繁殖区的原种;其余的经去杂去劣后,所收获的种子作为下年杂交制种区的父本种子。 (3)自交不亲和系杂交制种技术利用自交不亲和系配制单交种,将两个自交不亲和系相间种植,通过相互杂交产生杂种,并用蕾期授粉法保持自交不亲和系。 利用(自交不亲和系A×自交不亲和系B)×自交亲和系C的方式配制三交种,自交不亲和系A与B互为保持系。A×B的F1为自交不亲和杂交种子,自交亲和系C具有显性自交亲和基因,组配成可以正常结实的三交种,作为大田生产油菜的种子。 在杂交制种区内,父母本行比按1∶2~4相间种植,要注意调节父母本的播期和花期,促使父母本花期相遇,保证正常异交结实。成熟后收获母本行的种子,即为杂交种子。
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